（1）因地制宜选择配方。有高压蒸汽灭菌设备条件的最好选择麦粒培养基配方，没有的可用棉籽壳或棉籽壳、木屑综合培养基配方。
（2）准确称量。根据生产规模，按所选配方的要求比例，分别称取所需原料。
（3）原料预处理。
第一，麦粒。将称好的颗粒饱满、完整、末破皮、除去瘪粒和杂质的小麦浸泡于水中，使其充分吸水，浸泡时间因气温不同而有所不同，冬季15～18小时，秋季12～14小时，夏季8～10小时。吸水后将麦粒捞起，用清水冲洗，放于铝锅中煮熟（以不烂为宜）。然后捞起沥干水待用。麦粒的煮熟度对原种的质量至关重要，绝不能煮“开花”。经验不足者，煮制时宁愿煮得夹生点也不能煮过，否则易感染细菌，原种后期易吐黄水。
第二，木屑、棉籽壳等。制种前一天先预湿，即先加水喷洒至含水量达60％左右，让其充分吸水。
（4）拌料。
第一，麦粒培养基。将煮好晾干的麦粒，加入石膏、白糖（可先溶于水）、谷壳等其他原料，充分搅拌均匀，调节含水量到60％～65％，不能偏干或偏湿。偏干，菌丝生长稀疏、缓慢；偏湿，容易出现菌被，引起菌种瓶底局部麦粒胀破，甚至糊化，影响菌丝生长。
第二，棉籽壳、木屑等培养基。将预湿的培养料置于盆中或地上，在木屑、棉籽壳堆上均匀加入米糠、石膏、白糖（先溶于水）等其他原料，充分搅拌均匀；调节培养料含水量至60％～65％（用手紧抓培养料至指缝间有渗水但不滴水为宜）。
（5）装瓶。一般使用无色透明的专用菌种瓶（750毫升）或聚丙烯塑料菌种瓶、低压聚乙烯塑料菌种瓶，也有菇农用小口径的医用输液瓶。使用前应把空瓶清洗干净，并滴干水。将麦粒培养料装至瓶肩，然后将瓶身稍稍震动，让其松紧均匀合适，用干布将瓶口内壁、瓶身擦干净，塞上棉塞，用牛皮纸或报纸包扎封口。木屑、棉籽壳培养基装瓶时要一边装一边震动，使装进的培养料上下松紧均匀一致，旁边丰满无空隙，装至瓶肩为止，然后在培养料中间用圆锥形木棍打一个洞，可打至瓶底。最后将瓶口、瓶身擦洗干净，塞上棉塞，双层纸封口即可进行灭菌。
（6）灭菌。灭菌是杀死培养料中杂菌、控制污染、制种取得成功的关键措施之一。采用高压蒸汽灭菌或常压蒸汽灭菌法。但麦粒培养基最好使用高压蒸汽灭菌以免麦粒因长时间（常压10小时）焖蒸而溶烂，影响菌丝生长，导致杂菌感染。高压蒸汽灭菌时，在0.14～0.15兆帕压力下麦粒培养基保持两个小时，木屑、棉籽壳培养基保持2.5个小时。常压蒸汽灭菌温度升至100℃时保持10个小时。培养基灭菌结束后取出放进消毒好的冷却室冷却即可接种。
