登陆注册
16444500000028

第28章 DNA是如何复制的?

DNA分子的复制模式是怎样的?

在构建DNA分子的结构模型时,两位科学家沃森和克里克事实上已经提供了DNA分子的复制模式。他们充分了解DNA双螺旋的两条链互补(碱基配对)的重要性,这是DNA复制模式的基础。复制时,DNA双螺旋就像拉开拉链那样,两条链的配对碱基之间的氢链断开,碱基暴露出来,这就形成了两条“模板链”(母链)。然后作为合成原料的游离核苷酸按碱基配对的原则结合到模板链上去。最后,结合到模板链上各有一条新链(子链)形成,原来的一个双螺旋DNA分子就变成(复制)了两个双螺旋分子。这两个双螺旋分子中各含有一条母链和一条子链。DNA的这种复制方式称为“半保留复制”。在沃林和克里克1953年的原始论文中有关于DNA半保留复制模式推测的一段话:“我们的DNA模型实际上是一对模板,每一模板与另一个互补。我们设想:在复制前氢键断开,两条链松开、分离,然后每条链作为形成自己新链的模板,最后我们从原先仅有的一对链得到了两对链,而且准确地复制了碱基序列。”真是天才的推测!这一推测的DNA复制模式,后来得到了实验事实的充分证明。1957年,泰勒等人应用放射性标记的胸腺嘧啶与放射自显影技术,证明蚕豆根尖染色体的半保留复制。1958年,梅塞尔森和斯塔尔应用重氮标记与密度离心技术,证明大肠杆菌DNA的半保留复制。后来关于DNA分子复制的细节又有了更多的了解。1968年,日本生化学家冈崎等人发现DNA是“不连续”复制的。复制时,先在DNA模板链上合成一些短的片段,然后再连接成与母链等长而且互补的新链。DNA合成过程中的这些短片段,后来被称为“冈崎片段”。每一冈崎片段的合成都需要DNA多聚酶的作用。但DNA多聚酶只能把单个的核苷酸连接到已形成的核苷酸链上。因此,每一新的片段合成时,需要有一个已存在的片段作为“引物”。目前,已经可以在试管中人工复制DNA。这个体外的生化反应称为多聚酶链式反应(简称PCR)。这个反应大致是这样进行的:将DNA模板、多聚酶、作为合成原料的4种脱氧核苷酸和引物一起加入到一种特制的薄壁塑料管中。之所以要用薄壁管,是为了便于传热。先将试管置于90℃的高温中约20秒,使DNA模板拆开成两条链(这叫“变性”)。然后将试管转置于55℃的环境中约20秒,使一对引物分别结合到两条分开的模板上去。再在72℃的温度下放置约30秒,使单核苷酸从引物的一端一个接一个地连接上去,从而复制两条新链。于是,一个DNA双螺旋分子便复制成了两个。再重复一个上述的温度循环,两个便复制成四个,……如此循环下去,便可以得到大量的DNA分子。例如20次循环就可使DNA扩增至100万倍。这一切,都可以在带电脑控制的PCR仪内进行,非常方便。

最初的PCR技术有什么缺点?

以后的几个月里,缪里斯反复进行实验,结果表明PCR技术是可行的。1984年春,缪里斯贴出一张海报,叙述了PCR技术,但未能引起广泛注意。唯一感兴趣的人是细菌遗传学家、诺贝尔奖获得者、当时洛克菲勒大学的校长里德伯格。

最初的PCR技术有一个缺点,就是DNA多聚酶不耐热,在90℃以上的高温即失活。因此,反应过程中要不断添加新的DNA多聚酶。这不利于实现反应的自动化。1969年,有人从美国黄石国家公园温泉中的水生栖热菌体内分离纯化出了耐热的DNA多聚酶,后来的商品名叫Taq酶。1988年,西特斯公司的研究者们开始在PCR中使用Taq酶。这是PCR技术的重大改进,在此基础上实现了反应的自动化,从而PCR技术得到了极为广泛的应用。而缪里斯也因发明PCR技术而荣获1993年的诺贝尔化学奖。

同类推荐
  • 能源:不仅仅是危机

    能源:不仅仅是危机

    本书从独特的视角切入,以通俗易懂的语言阐述了核能、太阳能、风能等各种新能源的基本知识,演绎了能源的发展史,用生动的表达方式描绘了能源的知识。书中主要介绍了国内外新能源与可再生资源的发展状况,并对新能源与可再生资源的资源状况、利用原理与技术做了介绍。
  • 图文科普-神秘的星空

    图文科普-神秘的星空

    广袤太空,神秘莫测;大千世界,无奇不有;人类历史,纷繁复杂;个体生命,奥妙无穷。本书以图文并茂的编排形式为读者展示出更广阔的认知视野和想象空间。
  • 站在巨人肩上-从亚里士多德谈生物学

    站在巨人肩上-从亚里士多德谈生物学

    本套《站在巨人肩上》丛书,共30本,每本以学科发展状况为主脉,穿插为此学科发展做出重大贡献的一些杰出科学家的动人事迹,旨在从文化角度阐述科学,突出其中的科学内核和人文理念,增强读者科学素养。
  • 地球消失记——大地母亲的叹息

    地球消失记——大地母亲的叹息

    本书讲述了目前土地资源遭到破坏、土壤污染严重的状况,相关的知识和技术,以及保护土地资源的重要性,重点培养青少年对环保的认识和对土地资源的珍视。
  • 形形色色的现代武器(科普知识大博览)

    形形色色的现代武器(科普知识大博览)

    要想成为一个有科学头脑的现代人,就要对你在这个世界上所见到的事物都问个“为什么”!科学的发展往往就始于那么一点点小小的好奇心。本丛书带你进行一次穿越时空的旅行,通过这次旅行,你将了解这些伟大的发明、发现的诞生过程,以及这些辉煌成果背后科学家刻苦钻研的惊心时刻。
热门推荐
  • 源极天穹

    源极天穹

    源武大陆,以源为本。身怀神源血脉的叶羽,肩负着振兴家族的使命,带着梦想,踏上征途,开始迎接一个又一个挑战。问鼎之路,阻难重重,危险机遇,伴随而来。且看,神源血脉,君临天下,直指巅峰,傲视天穹!
  • 廉吏传

    廉吏传

    本书为公版书,为不受著作权法限制的作家、艺术家及其它人士发布的作品,供广大读者阅读交流。
  • 被放逐者报告

    被放逐者报告

    I-will-be-back!他说:我会回来的!人物:路易亨利,银河联邦‘地精灵’种族-华裔混血种,泰勒国王大学“生物化学及医学工程学院”在读博士。事由缘起:作为星际大航海以来‘放逐者’计划的联邦翻版,联邦政府打算在‘先锋植物’项目中,将众多A级重犯无限期流放于危机四伏的域外边疆星系,作为联邦向外扩张,向深广星空殖民的马前卒、探路者和拓荒者。因故犯下凶杀重罪的路易亨利,因‘先锋植物’项目被联邦流放,成为‘被放逐者’当中的一员,成为随时可能被舍弃的小卒子、可怜虫和炮灰。在强大的国家机器面前,再凶暴的A级重犯也是柔弱羔羊。但是,他说:我会回来的!他能重新回到联邦复仇吗?他会如愿以偿吗?他会取得成功吗?于是,一个与奇遇、避祸、复仇及探险拓荒相关的故事,一个发生在未来银河联邦的传奇,就这样开始了。
  • 鬼鳥

    鬼鳥

    武学菜鸟的另类成材之路,没有奇特的天赋,也没有天赐的运气和秘籍。靠的是自己一双手,一颗热血的心,一腔无畏的勇气,一股坚韧的精神撑过一次次的难关成长为世人仰视的存在。
  • 冰心故我冷艳女皇

    冰心故我冷艳女皇

    他为了她当下了致命一击,一命呜呼,她又为了他不再痛苦而放弃,却伤人伤己,为复仇不惜坠入魔道,但天命弄人,仇人却是她,在亲情和爱情之间她会选择哪个,生死领悟,终悟出凡尘,她愿下生做他身后的女人,两世倾世绝恋,见证了一代女皇和一代王者的悲欢离合,生死爱恋两世的记忆,两世的使命,一次爆发,在使命和爱情之间她又是如何?她一代天才,创建势力,身跟妖孽,美男温情,她钟爱他。她一生坚强,一步步踏上女王之路。(小雪第一次写文文,写的不好多多包涵。)
  • 许你一世梨花香

    许你一世梨花香

    为了逃避他的深情,一次偶然落水,却穿越至前生。前生我是梨花一片,落在今生你的指尖,只为见你凄美的笑脸,我在佛前求了千年。柳语嫣,柳家大小姐。风华绝代,生性活泼,温柔可人。因一场误会嫁给官宦世子左枭雄。洞房之夜,他挑起盖头,却决然而去。情节虚构,切勿模仿
  • 娇妻的烦恼

    娇妻的烦恼

    [花雨授权]人人都羡慕她嫁进了豪门当少奶奶,不仅老公英俊、温柔体贴,还能住豪宅、坐名车,却没人知道少奶奶实在不好当!简直心力交瘁。幸好有亲亲好老公!老公旧情人出现了?“豪门娇妻”就要变“豪门焦妻”了……
  • 废材逆天:极品元素师

    废材逆天:极品元素师

    豪门千金订婚宴上当场逃婚,本以为可以获得那宝贵的自由,谁知天不遂人愿,因为一块玉,被人枪杀,这还不说算,连尸体都被闪电轰没了,之后的之后我们的女主就离奇穿越了。离幻大陆,一个以武为尊的世界,女主在这里开启了自己从废材蝼蚁到化羽成神的蜕变。“看,那个废物回来了。”“切,回来了又如何,还不是个废物,早晚都会死在魔兽森林。”听着周围那些人言语恶毒,她平静如初,因为她知道,她一定会让那些曾羞辱她的人后悔今天的所为。开灵脉,魔武双修,碾压一切天才,契神兽,炼丹药,走向人界至强。
  • 堕落神魂

    堕落神魂

    正邪之道,何为正邪???神魂破碎,颠覆修真···我欲成魔,天奈我何!!!
  • 星际雇佣兵

    星际雇佣兵

    成为一个佣兵团团长的前提是啥?当然是船啦,太空飞船都没有怎么当船长?有了船长和船还需要点啥?驾驶员、后勤人员、厨师、医师、武器师、修理师、情报师、格斗师、狙击手一个都不能少。要是再来个漂亮温柔的女仆那就相当完美了。不是两个,三个也行.......