（4）蒸馏水清洗；
（5）碳酸锂溶液单张分化切片30秒；
（6）继续用70％酒精分化直至灰质清晰、白质明显可辨；
（7）显微镜下观察，如有必要，从第5步开始反复分化；
（8）分化结束后，置于蒸馏水中；
（9）当所有切片进入蒸馏水后，加入新鲜蒸馏水；
（10）坚牢焦油紫溶液复染6分钟，复染还可选用苏木素—伊红和PAS法；
（11）95％酒精清洗2次；
（12）继续用纯酒精脱水2次，二甲苯透明2次，每次均为2分钟；
（13）树脂封固。
5．结果
髓鞘，包括磷脂 蓝—绿色
细胞及细胞产物粉红—紫色
坚牢蓝染色可与其他染色，如鲍地安·穴Bodiamd’s）法同时进行。
八、Woelche氏髓鞘染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，20微米。
3．试剂
2．5％硫酸铁铵溶液（见第15章）
10％酒精苏木素贮存液（见第15章）
饱和碳酸锂溶液
碳酸锂1．54克
蒸馏水99毫升
苏木素工作液？穴按下面列出之顺序将下列试剂混合
蒸馏水45毫升
10％酒精苏本素贮存液，过滤 10毫升
饱和碳酸锂溶液，过滤 7毫升
蒸馏水45毫升
务必按上述顺序混合，不得摇动。
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）2．5％硫酸铁铵溶液中过夜；
（3）蒸馏水清洗2次；
（4）苏木素工作液染2小时；
（5）80％酒精分化直至背景无色；
（6）95％酒精和纯酒精各脱水2次，每次2分钟；二甲苯透明2次，每次2分钟；
（7）树脂封固。
5．结果
髓鞘、核 黑色
胶质细胞黑色
背景无色
九、显示异染性白质营养不良的Hirch－Peiffel染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，12～20微米。
3．试剂
0．04％焦油紫贮存液
焦油紫V0．04克
蒸馏水85毫升
冰醋酸15毫升
15％三乙醇胺溶液
三乙醇胺15毫升
蒸馏水85毫升
焦油紫—三乙醇胺工作液
取等量焦油紫V贮存液与15％三乙醇胺液混合？穴如：各取100毫升）。
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）将焦油紫—三乙醇胺工作液在60℃烘箱中预热l小时；
（3）用预热的焦油紫—三乙醇胺溶液在60℃烘箱中染10分钟；
（4）取出烘箱，冷却至室温？穴20℃～25℃）；
（5）切片移至蒸馏水；
（6）蒸馏水清洗2次，每次5分钟；
（7）甘油明胶封固。
5．结果
异常硫酸脑苷脂棕色
其他结构蓝—棕色
十、髓鞘和胶质纤维的磷钨酸苏木素染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，6微米。
3．试剂
磷钨酸苏木素溶液
苏木素1克
磷钨酸20克
蒸馏水100毫升
将苏木素和磷钨酸分别溶解于蒸馏水中，加热可促使苏木素溶解，待其冷却后，即可与溶解于蒸馏水中的磷钨酸混合，不需防腐剂，溶液通常需数周成熟，但加入0．2克高锰酸钾可使染液即时成熟，加入新鲜配制之1％高锰酸钾溶液20毫升亦可使其即时成熟。
0．25％高锰酸钾溶液 （见第15章）
卢戈氏（1ugoI’s）碘液（见第15章）
5％草酸溶液（见第15章）
2．5％重铬酸钾贮存液（见第15章）
2．5％重铬酸钾工作液
2．5％重铬酸钾溶液 95毫升
冰醋酸 5毫升
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）重铬酸钾工作液氧化切片，过夜；
（3）自来水清洗15分钟；
（4）卢戈氏碘液15分钟；
（5）95％酒精去碘1小时，换几次95％酒精，使棕色的 碘去掉；
（6）蒸馏水快速清洗3次；
（7）0．25％高锰酸钾氧化5分钟；
（8）蒸馏水快速清洗3次；
（9）5％草酸5分钟；
（10）蒸馏水快速清洗3次；
（11）磷钨酸苏木素液内染色，过夜；
（12）95％酒精清洗以去除过染；
（13）纯酒精快速脱水3次；
（14）二甲苯透明3次，每次3分钟；
（15）树脂封固。
5．结果
核、髓鞘、胶质细胞突起 蓝色
胞浆 水红
十一、Penfield氏少突胶质和小胶质细胞联合染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林，福尔马林溴化铵。
2．切片冷冻，15～20微米。
3．试剂
福尔马林溴化铵溶液
37％～40％甲醛 15毫升
溴化铵2克
蒸馏水85毫升
5％氢溴酸溶液 （见第15章）
5％碳酸钠溶液 （见第15章）
10％硝酸银溶液（见第15章）
浓氢氧化铵
Hortega’s碳酸银溶液
10％硝酸银水溶液5毫升
5％碳酸钠水溶液 20毫升
一滴一滴地加入28％氢氧化铵，用力振荡，加入足量的氢氧化铵，使生成之沉淀物溶解，加蒸馏水至75毫升。
1％福尔马林溶液 （见第15章）
1％氯化金贮存液 （见第15章）
5％硫代硫酸钠溶液 （见第15章）
4．步骤
（1）将福尔马林固定的组织放入福尔马林溴化铵液内3～5天；
（2）将组织切片裱在干净的有标记的玻片上，彻底干燥；
（3）放入加有10～15滴氢氧化铵的蒸馏水中，过夜，以去除微量福尔马林；
（4）转至氢溴酸溶液，37℃烘箱中1小时；
（5）取出烘箱，蒸馏水洗3次；
（6）碳酸钠溶液处理l小时，切片可保留在碳酸钠溶液中，无有害影响；
（7）将碳酸银溶液倒在切片上，反应3～5分钟。用显微镜监测胶质细胞及其突起的浸染情况，切片放上显微镜载物台之前应擦拭切片的背面。如果必要，可用碳酸银溶液再次处理切片；
（8）放入l％福尔马林液中直至切片呈一致的灰色，轻轻地摇动染色缸；
（9）蒸馏水彻底清洗；
（10）氯化金溶液着色，直至切片为蓝—灰色；
（11）蒸馏水彻底清洗；
（12）硫代硫酸钠溶液固定30～45秒；
（13）蒸馏水清洗；
（14）95％酒精和纯酒精各脱水2次，每次2分钟；二甲苯透明2次，每次2分钟；
（15）树脂封固。
5．结果：
少突胶质细胞和小胶质细胞黑色
背景棕—黄色
十二、Holzer氏胶质纤维染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林或甲醛酒精。
2．切片石蜡，6微米。
3．试剂
磷钼酸—酒精溶液
0．5％磷钼酸50毫升
95％酒精100毫升
新鲜配制。
纯酒精—氯仿溶液
100％酒精 40毫升
氯仿160毫升
注意通风，勿吸入氯仿蒸气。
结晶紫溶液
结晶紫5克
100％酒精 20毫升
氯仿80毫升
溴化钾溶液
溴化钾10克
蒸馏水100毫升
一次配制1000毫升该溶液较为经济，即100克溴化钾溶于1000毫升蒸馏水中。
分化液
苯胺120毫升
氯仿180毫升
28％氢钒化铵 20滴
使用苯胺时勿接触皮肤。
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）磷钼酸酒精溶液内3分钟；
（3）滴干切片；
（4）倒上酒精—氯仿溶液，保持至切片变为半透明状；
（5）将切片放在染色架上，结晶紫溶液淹没切片染30秒，吸干切片，如果切片上有结晶紫沉淀形成，可用未稀释的苯胺除去；
（6）将切片放回染色架；
（7）溴化钾溶液淹没切片1分钟，吸干；
（8）放入分化液内30秒，如果切片过度分化则重新染色；
（9）二甲苯清洗和透明数次，换第一次二甲苯时用显微镜检查切片；
（10）树脂封固。
5．结果
胶质细胞和纤维深紫色
背景淡紫色
十三、Cajal氏星形细胞升汞金染色法
1．固定福尔马林溴化铵。
2．切片冷冻，15～30微米。
3．试剂
福尔马林溴化铵溶液
37％～40％甲醛15毫升
溴化铵2克
蒸馏水85毫升
Cajal氏升汞金溶液
二氯化汞结晶0．5克
1％棕色氯化金水溶液 6毫升
蒸馏水35毫升
储存于棕色瓶内。
5％硫代硫酸钠溶液 （见第15章）
Hortega氏石炭酸—二甲苯杂酚油混合液
杂酚油10毫升
苯酚结晶，熔化 10毫升
二甲苯80毫升
4．步骤
（1）冷冻切片？熏入蒸馏水；
（2）切片平放入新鲜配制的升汞氯化金溶液内4～6小时；室温，置于暗处；
（3）用显微镜观察一张样片，应转变为紫色；
（4）蒸馏水洗5～10分钟；
（5）硫代硫酸钠溶液内5～10分钟；
（6）蒸馏水充分洗数次；
（7）将单张切片逐一漂捞至干净载片上；
（8）空气干燥；
（9）以95％酒精开始脱水；
（10）石炭酸—二甲苯杂酚油混合液透明，或用95％酒精；纯酒精和二甲苯脱水与完全透明各2次，每次2分钟；
（11）树脂封固。
5．结果
星形细胞及突起黑色
神经细胞淡红色
神经纤维不着色
背景透明到浅棕—紫色
